试剂A:1%BCA二钠盐,2%无水碳酸钠,0.16%酒石酸钠,0.4%氢氧化钠,0.95%碳酸氢钠. 混合调PH值至11.25。试剂B:4%硫酸铜。蛋白质标准液:用结晶牛血清白蛋白根据其...
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跑wb时蛋白的最低浓度是多少 |
wb蛋白提取浓度太低什么原因,wb蛋白太稀了怎么补救
②蛋白质含量低,可能是上样量过低或蛋白质裂解不充分,建议按照蛋白质提取步骤增加上样量或充分裂解蛋白质~③不使用0.22μ膜,小孔径的膜不适合小分子蛋白质,对小分子蛋白质有良好的截留和吸附效果。但原因是:提取过程中外源蛋白酶的影响蛋白质标记的使用会导致蛋白质带降解;标记也是蛋白质产品。如果
5、最终测得的组织蛋白浓度一般都比较高,我测得在30ug/ul以上,此时不要考虑稀释到与细胞蛋白相同的浓度,因为组织蛋白的纯度比较低。 有时需要大量样品才能达到目标。它可以与二价铜离子结合生成紫色络合物。 测量562nm波长处的吸光度并绘制标准曲线。吸光度与蛋白质浓度成正比。
答:出现沉淀可能是因为你的蛋白质没有完全变性。你可以适当提高SDS浓度,延长样品的煮沸时间。也不排除你的抗原浓度过高。这种情况下,请添加适量的上样缓冲液。 2我制作的蛋白分子量很小(10K12。为什么改性WB中没有低质量条带?答:1)进行SDS-PAGE看低质量蛋白条带的丰度,确保蛋白量足够;(2)凝胶的压缩分离效果不好,低质量蛋白本身容易分散。
3.我的细胞提取物有的有沉淀物,有的很清澈,为什么? 答:a)可能会有沉淀,因为你的蛋白质没有完全变性,可以适当增加SDS浓度,同时延长样品的煮沸时间。一般在96℃以上大约需要10-15分钟;b)另外回答:a)可能会有沉淀,因为你的蛋白质没有完全变性,可以适当增加SDS浓度,延长样品煮沸时间。b)不排除你的抗原浓度过高。这种情况下,只需添加适量的上样缓冲液即可。 4.我制造的蛋白质具有很高的分子量
1.什么是WB?百度告诉你:WesternBlotis将电泳分离后的细胞中的蛋白质从凝胶转移到固体支撑NC膜或PVDF膜上,然后用特异性抗体进行检测。 确定答案:a)如果有沉淀,可能是因为你的蛋白质没有变性*。你可以适当提高SDS浓度,延长样品的煮沸时间。b)不排除你的抗原浓度太高。这种情况,请添加适量的上样缓冲液。 液体。 4.伊迪迪特
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标签: wb蛋白太稀了怎么补救
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